फेनिलग्यालेक्टोसाइड CAS:२८१८-५८-८

इन्जाइम गतिविधिमा प्रभाव: फेनिलग्यालेक्टोसाइड सामान्यतया β-galactosidase इन्जाइमको गतिविधि मापन गर्न प्रयोग गरिन्छ। जब फिनाइलग्यालेक्टोसाइडलाई β-galactosidase द्वारा हाइड्रोलाइज गरिन्छ, यसले p-nitrophenol रिलिज गर्दछ। p-nitrophenol को संचय मात्रात्मक रूपमा मापन गर्न सकिन्छ, जसले β-galactosidase को गतिविधिमा अन्तर्दृष्टि प्रदान गर्दछ। यो प्रभाव इन्जाइम परीक्षण र स्क्रिनिङ प्रणाली जस्ता अनुप्रयोगहरूमा प्रयोग गरिन्छ।

जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण: जीन अभिव्यक्ति अध्ययन गर्न आणविक जीवविज्ञान प्रयोगहरूमा फेनिलग्यालेक्टोसाइड प्रायः सब्सट्रेटको रूपमा प्रयोग गरिन्छ। β-galactosidase लाई एन्कोड गर्ने lacZ जीन सामान्यतया अन्य रुचिको जीनहरूको नियामक अनुक्रमहरूसँग फ्यूज हुन्छ। lacZ जीनको अभिव्यक्ति र β-galactosidase द्वारा phenylgalactoside को हाइड्रोलिसिसले अध्ययन भइरहेको लक्षित जीनको अभिव्यक्ति ढाँचा र स्तरलाई संकेत गर्न सक्छ।

स्क्रिनिङ प्रणालीहरू: फेनिलग्यालेक्टोसाइड β-ग्यालेक्टोसिडेज गतिविधि प्रयोग गर्ने स्क्रिनिङ प्रणालीहरूको एक महत्त्वपूर्ण घटक हो। एउटा व्यापक रूपमा ज्ञात उदाहरण नीलो-सेतो स्क्रिनिङ विधि हो, जुन आणविक जीवविज्ञान प्रयोगहरूमा पुन: संयोजक वा रूपान्तरित कोशिकाहरू पहिचान गर्न प्रयोग गरिन्छ। पुन: संयोजक DNA सफलतापूर्वक लिइसकेका वा आनुवंशिक पुनर्संयोजनबाट गुज्रिसकेका उपनिवेशहरूले β-ग्यालेक्टोसिडेज व्यक्त गर्नेछन्, जसले गर्दा फिनिलग्यालेक्टोसाइडको हाइड्रोलिसिस हुन्छ र नीलो रंगको गठन हुन्छ।

प्रोटिन शुद्धीकरण: केही अवस्थामा, फिनाइलग्यालेक्टोसाइडलाई एफिनिटी क्रोमेटोग्राफीको लागि लिग्यान्डको रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ जसले विशेष रूपमा β-galactosidase सँग बाँधिएका वा सक्रिय गरिएका प्रोटीनहरूलाई शुद्ध गर्दछ। रुचिको प्रोटीनमा एफिनिटी ट्याग वा β-galactosidase-बाइन्डिङ डोमेन भएको फ्युजन ट्याग हुन सक्छ। प्रोटीन मिश्रणलाई स्थिर फिनाइलग्यालेक्टोसाइड भएको स्तम्भबाट पार गरेर, इच्छित प्रोटीनलाई छनौट रूपमा राख्न सकिन्छ र पछि एल्युट गर्न सकिन्छ।