4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

प्रभाव: ONPG एक सब्सट्रेट हो जुन विशेष रूपमा इन्जाइम β-galactosidase को उपस्थिति र गतिविधि पत्ता लगाउन प्रयोग गरिन्छ।जब β-galactosidase इन्जाइम उपस्थित र सक्रिय हुन्छ, यसले ONPG लाई दुई उत्पादनहरूमा क्लीभ गर्दछ: ओ-नाइट्रोफेनोल र ग्यालेक्टोज व्युत्पन्न।ओ-नाइट्रोफेनोलको मुक्तिले पहेंलो रंग परिवर्तनमा परिणाम दिन्छ, जुन स्पेक्ट्रोफोटोमिटर प्रयोग गरेर मापन गर्न सकिन्छ।

आवेदन: ONPG सँग आणविक जीवविज्ञान र जैव रसायन अनुसन्धानमा धेरै अनुप्रयोगहरू छन्:

β-galactosidase गतिविधि को निर्धारण: ONPG सामान्यतया β-galactosidase इन्जाइम को गतिविधि मापन र मात्रा मापन गर्न प्रयोग गरिन्छ।ओ-नाइट्रोफेनोल गठनको दर, जुन इन्जाइम गतिविधिको सीधा समानुपातिक हुन्छ, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूपमा मापन गर्न सकिन्छ।

जीन अभिव्यक्ति र नियमन: ओएनपीजी प्रायः जीन अभिव्यक्ति र नियमन अध्ययनसँग सम्बन्धित प्रयोगहरूमा प्रयोग गरिन्छ।यो प्रायः फ्युजन प्रोटीन एसेसहरूमा प्रयोग गरिन्छ, जस्तै सामान्यतया प्रयोग हुने lacZ फ्यूजन प्रणाली, विशिष्ट प्रमोटरहरूको नियन्त्रणमा जीनको अभिव्यक्ति अध्ययन गर्न।ONPG को प्रयोग गरेर मापन गरिएको beta-galactosidase गतिविधिले जीन अभिव्यक्तिको स्तरमा अन्तर्दृष्टि प्रदान गर्दछ।

β-galactosidase गतिविधिको लागि स्क्रिनिङ: ONPG लाई β-galactosidase इन्कोड गर्ने LacZ जीनको उपस्थिति र कार्यक्षमता पहिचान गर्न पुनः संयोजक DNA प्रविधिमा कलरमेट्रिक स्क्रिनिङ विधिको रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।यो स्क्रिनिङ विधिले रुचिको जीन समावेश गर्ने क्लोनहरू पहिचान गर्न मद्दत गर्छ।

इन्जाइम काइनेटिक्स अध्ययन: ONPG β-galactosidase इन्जाइमको गतिशास्त्र अध्ययन गर्न पनि उपयोगी छ।विभिन्न सब्सट्रेट सांद्रतामा इन्जाइम-सब्सट्रेट प्रतिक्रियाको दर मापन गरेर, माइकलिस-मेन्टेन स्थिरांक (किमी) र अधिकतम प्रतिक्रिया दर (Vmax) जस्ता गतिज मापदण्डहरू निर्धारण गर्न सम्भव छ।