हाम्रो वरिपरि धेरै अनगिन्ती नायकहरू छन्, जो सामान्य देखिन्छन्, तर वास्तवमा उनीहरूले चुपचाप हामीलाई धेरै योगदान दिन्छन्।Proteinase K आणविक निदान उद्योगमा "अनसङ्ग हिरो" हो, यद्यपि उद्योगमा "ठूलो र शक्तिशाली" को तुलनामा, प्रोटीनेज K यति कम-कुञ्जी हो कि हामीले यसको महत्त्वलाई लामो समयदेखि बेवास्ता गरेका छौं।नयाँ क्राउन महामारीको प्रकोप संग, प्रोटीनेज K को माग बढेको छ, र स्वदेश र विदेशमा आपूर्ति खपत भन्दा धेरै पछाडि छ, र सबैले अचानक महसुस गरे कि प्रोटीनेज K धेरै महत्त्वपूर्ण छ।
प्रोटीनेज K को प्रयोग के हो?
Proteinase K प्रोटियोलाइटिक इन्जाइम गतिविधि भएको सेरीन प्रोटीज हो र यसले वातावरणको विस्तृत दायरा (पीएच (4-12.5), उच्च नुन बफर, 70 डिग्री सेल्सियसको उच्च तापक्रम, आदि) मा गतिविधि कायम राख्न सक्छ।थप रूपमा, प्रोटीनेज K को गतिविधि SDS, यूरिया, EDTA, guanidine हाइड्रोक्लोराइड, guanidine isothiocyanate, आदि द्वारा रोक्दैन, र डिटर्जेन्टको एक निश्चित मात्राले पनि प्रोटीनेज K को गतिविधि बढाउन सक्छ। चिकित्सा उपचारमा (भाइरस र माइक्रोबियल कीटाणुशोधन। ), खाना (मासुको टेन्डराइजेशन), छाला (कपाल नरम बनाउने), वाइनमेकिंग (अल्कोहल स्पष्टीकरण), एमिनो एसिड तयारी (डिग्रेडेड फेथर्स), न्यूक्लिक एसिड एक्स्ट्र्याक्सन, इन सिटु हाइब्रिडाइजेशन, आदि, प्रोटीनेज के अनुप्रयोगहरू छन्।सबैभन्दा सामान्य रूपमा प्रयोग गरिएको अनुप्रयोग न्यूक्लिक एसिड निकासी हो।
प्रोटिनेज K ले नमूनामा सबै प्रकारका प्रोटिनहरू इन्जाइमोलाइज गर्न सक्छ, ती हिस्टोनहरू समावेश गर्दछ जुन न्यूक्लिक एसिडसँग कडा रूपमा बाँधिएको हुन्छ, ताकि न्यूक्लिक एसिडहरू नमूनाबाट निकाल्न सकिन्छ र निकासी र शुद्धिकरणको अर्को चरणमा सहजीकरण गर्न सकिन्छ।भाइरल न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउन, प्रोटीनेज K भाइरस नमूना समाधान मा एक महत्वपूर्ण घटक हो।प्रोटिनेज K ले भाइरसको कोट प्रोटीनलाई क्र्याक र निष्क्रिय पार्न सक्छ, जुन यातायात र पत्ता लगाउने चरणमा सुरक्षित हुन्छ;थप रूपमा, प्रोटीनेज K ले पनि RNase लाई घटाउन सक्छ भाइरल आरएनएको गिरावटलाई रोक्छ र न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउन मद्दत गर्दछ।
प्रोटिनेस K को रातारात प्रसिद्धि
चाहे वैज्ञानिक अनुसन्धानको क्षेत्रमा होस् वा IVD को क्षेत्रमा, न्यूक्लिक एसिड निकासी सबैभन्दा आधारभूत प्रयोग हो, त्यसैले proteinase K सधैं एक धेरै महत्त्वपूर्ण अस्तित्व भएको छ।यद्यपि, विगतमा, प्रोटीनेज K यसको भूमिका भन्दा धेरै कम प्रसिद्ध थियो।प्रोटीनेज K को आपूर्ति र माग सम्बन्ध धेरै स्थिर थियो किनभने यसको ठूलो भाग थियो।प्रोटिनेज K को आपूर्ति समस्या हुनेछ भनेर थोरै मानिसहरूले सोच्छन्।
नयाँ क्राउन महामारीको प्रकोपसँगै, न्यूक्लिक एसिड परीक्षणको माग बढेको छ।जुन 2020 को अन्त सम्म, चीनले लगभग 90 मिलियन नयाँ क्राउन परीक्षणहरू पूरा गरेको छ, र यो संख्या विश्वव्यापी स्तरमा अझ चिन्ताजनक छ।न्यूक्लिक एसिड निकासी प्रयोगहरूमा, प्रोटीनेज K को काम गर्ने एकाग्रता लगभग 50-200 μg/mL छ।सामान्यतया, न्यूक्लिक एसिडको नमूना निकाल्न लगभग 100 μg प्रोटीनेज K लिन्छ।वास्तविक प्रयोगमा, न्यूक्लिक एसिड निकासीको दक्षता बढाउनको लागि, प्रायः प्रोटिनेज के बढि मात्रामा प्रयोग गरिनेछ।नयाँ कोरोनाभाइरसको न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउनेले प्रोटीनेज के को ठूलो मात्रामा माग ल्याएको छ।प्रोटीनेज K को मौलिक आपूर्ति र माग सन्तुलन तुरुन्तै टुट्यो, र प्रोटीनेज K रातारात एक महत्त्वपूर्ण महामारी रोकथाम सामग्री बन्यो।
प्रोटीनेज के उत्पादनमा कठिनाइहरू
महामारीको विकाससँगै प्रोटिनेज K को महत्त्वपूर्ण मूल्य मानिसहरूले मूल्याङ्कन गरेको भए पनि प्रोटिनेज K को अत्याधिक कम-कुञ्जीका कारण थोरै स्वदेशी कम्पनीहरूले प्रोटिनेज के उत्पादनमा संलग्न भएका छन्। प्रोटीनेज K उत्पादन स्थापना गर्न चाहन्छ उत्पादन प्रक्रियाको क्रममा, यो पत्ता लाग्यो कि प्रोटीनेज K एक अत्यन्त विशेष प्रोटीन हो।प्रोटिनेज K को उत्पादन क्षमता छोटो अवधिमा विस्तार गर्न निकै चुनौतीपूर्ण छ।
प्रोटीनेज K को ठूलो मात्रामा उत्पादन निम्न कठिनाइहरूको सामना गर्दछ
1. कम अभिव्यक्ति
प्रोटिनेज K ले गैर-विशेष रूपमा प्रायः प्रोटीनहरू घटाउन सक्छ र अभिव्यक्ति होस्ट सेलमा गम्भीर विषाक्तता निम्त्याउन सक्छ।त्यसैले, प्रोटीनेज K को अभिव्यक्ति स्तर सामान्यतया धेरै कम छ।प्रोटिनेज K लाई उच्च रूपमा अभिव्यक्त गर्ने अभिव्यक्ति प्रणाली र तनावहरूको स्क्रिनिङलाई सामान्यतया लामो चक्र चाहिन्छ।
2. पिग्मेन्ट र न्यूक्लिक एसिडका अवशेषहरू
ठूलो मात्रामा किण्वनले ठूलो मात्रामा रंगद्रव्य र होस्ट न्यूक्लिक एसिड अवशेषहरू प्रस्तुत गर्दछ।यी अशुद्धताहरूलाई सरल शुद्धिकरण प्रक्रियाबाट हटाउन गाह्रो छ, र जटिल शुद्धीकरणले लागत बढाउँछ र रिकभरी दर घटाउँछ।
3. अस्थिरता
प्रोटिनेज K पर्याप्त स्थिर छैन, यसले आफैलाई इन्जाइमोलाइज गर्न सक्छ, र यसलाई सुरक्षात्मक एजेन्ट बिना लामो समयको लागि 37 डिग्री सेल्सियसमा स्थिर रूपमा भण्डारण गर्न गाह्रो छ।
4. अवक्षेपण गर्न सजिलो
प्रोटीनेज K को फ्रिज-ड्राइड पाउडर तयार गर्दा, फ्रिज-ड्राइड पाउडरमा प्रोटीनेज K को ठोस सामग्री ठूलो छ भनेर सुनिश्चित गर्न, उच्च एकाग्रतामा फ्रिज-ड्राइड प्रोटेक्टिभ एजेन्ट थप्न आवश्यक छ, तर जब प्रोटीनेज K को एकाग्रता 20mg/mL र माथि पुग्छ, यो सजिलो छ एकत्रीकरणले एक अवक्षेपण बनाउँछ, जसले उच्च ठोस सामग्रीको साथ प्रोटीनेज K को फ्रिज-सुकाउन ठूलो कठिनाइहरू ल्याउँछ।
5. ठूलो लगानी
प्रोटिनेज K सँग बलियो प्रोटीज गतिविधि छ र प्रयोगशालामा अन्य प्रोटीजहरूलाई हाइड्रोलाइज गर्न सक्छ।तसर्थ, प्रोटीनेज K लाई अनुसन्धान र विकास र उत्पादनको लागि विशेष उत्पादन क्षेत्रहरू, उपकरणहरू, र कर्मचारीहरू चाहिन्छ।
XD बायोकेमको प्रोटीनेज K समाधान
XD BIOCHEM सँग परिपक्व प्रोटीन अभिव्यक्ति र शुद्धिकरण प्लेटफर्म छ, र पुन: संयोजक प्रोटीनहरूको अभिव्यक्ति र शुद्धीकरण र उत्पादन प्रक्रियाहरूको अनुकूलनमा समृद्ध अनुभव छ।अनुसन्धान र विकास टोलीको द्रुत गठनको माध्यमबाट, प्रोटीनेज K को ठूलो मात्रामा उत्पादन प्रक्रियालाई पार गरिएको छ।फ्रिज-ड्राइड पाउडरको मासिक उत्पादन 30 किलोग्राम भन्दा बढी छ।उत्पादनमा स्थिर प्रदर्शन, उच्च इन्जाइम विशिष्ट गतिविधि, र कुनै होस्ट साइटोक्रोम र न्यूक्लिक एसिड अवशेषहरू छन्।XD BIOCHEM लाई सम्पर्क गर्न स्वागत छ एक परीक्षण प्याकेज प्राप्त गर्नुहोस् (ई-मेल:sales@xdbiochem.comटेलिफोन: +८६ ५१३ ८११६३७३९)।
XD BIOCHEM को प्राविधिक समाधानहरू समावेश छन्
बहु-प्रतिलिपि प्लाज्मिड एकीकरण प्रयोग गरेर, 8g/L को अभिव्यक्ति स्तरको साथ उच्च-अभिव्यक्ति तनावहरू चयन गरिन्छ, जसले प्रोटीनेज K को कम अभिव्यक्ति स्तरको समस्यालाई पार गर्दछ।
बहु-चरण शुद्धिकरण प्रक्रियाको स्थापना मार्फत, प्रोटिनेस K को होस्ट साइटोक्रोम र न्यूक्लिक एसिड अवशेषहरू सफलतापूर्वक मानक मूल्य भन्दा तल हटाइयो।
सुरक्षात्मक बफर सूत्रहरूको उच्च-थ्रुपुट स्क्रीनिंग मार्फत, प्रोटीनेज K लाई स्थिर रूपमा 37 डिग्री सेल्सियसमा भण्डारण गर्न सक्ने बफर चयन गरिएको थियो।
स्क्रिनिङ बफरहरूले प्रोटिनेज K ले उच्च सांद्रतामा जम्मा गर्न सजिलो छ र प्रोटीनेज K को उच्च ठोस सामग्री फ्रिज-ड्राइङको लागि जग राख्छ भन्ने समस्यालाई पार गर्दछ।
XD बायोकेम प्रोटीनेज K नमूना
XD BIOCHEM proteinase K स्थिरता परीक्षण: कोठाको तापमानमा 80 d पछि गतिविधिमा कुनै महत्त्वपूर्ण परिवर्तन हुनेछैन।
XD BIOCHEM proteinase K स्थिरता परीक्षण: कोठाको तापमानमा 80 d पछि गतिविधिमा कुनै महत्त्वपूर्ण परिवर्तन हुनेछैन।
XD BIOCHEM proteinase K र प्रतिस्पर्धी उत्पादनहरूको न्यूक्लिक एसिड निकासी प्रभावको तुलना।न्यूक्लिक एसिड निकासीको प्रक्रियामा, XD बायोकेम र प्रतिस्पर्धी प्रोटीनेज K क्रमशः प्रयोग गरिन्छ।XD BIOCHEM proteinase K को निकासी दक्षता उच्च छ र लक्ष्य जीनको Ct मान कम छ।
पोस्ट समय: डिसेम्बर-31-2021